Mediciones de Microvolumen Buenas Prácticas

 

Las mediciones de microvolumen, en la actualidad, se encuentran ligadas a instrumentos conocidos con el nombre común de micropipetas. Estos son instrumentos para medir volúmenes que se valen de un procedimiento mecánico de absorción y descarga de líquidos, similar al de una jeringa, muy usada en tratamientos médicos.

Las micropipetas, también llamadas pipetas de pistón, pueden ser diseñadas para dispensar un volumen fijo (pipetas de pistón de volumen fijo) o varios volúmenes dentro de un intervalo establecido por un mecanismo selector (pipetas de pistón de volumen variable). En ambos casos, es necesario respetar y cumplir con las instrucciones de uso que indiquen los fabricantes, sin embargo, acá se mencionan algunas recomendaciones al momento de realizar mediciones de microvolúmenes:

·      Seleccionar adecuadamente el instrumento a utilizar, es decir, si las mediciones se realizan en un volumen determinado, por ejemplo 100 microlitros, se recomienda seleccionar una pipeta de volumen fijo. Esto minimizará las posibles variaciones por saltos o vulneraciones de los seguros de las pipetas de pistón de volumen variable.

·      Utilizar puntas recomendadas para el instrumento, cuidando que éstas sellen adecuadamente al ser asentadas en el instrumento, evitando posibles fugas del líquido que conllevarán a errores por defecto en las descargas.

·      Al absorber, se recomienda mantener el instrumento alineado verticalmente, es decir, mantener un ángulo de 90° respecto a la superficie del líquido a absorber.

·      Durante la absorción, procurar que la carrera del pistón sea uniforme o de velocidad constante, minimizando interrupciones o saltos bruscos que podrían variar el volumen requerido.

·      Respetar el tiempo de espera indicado por el fabricante antes de la extracción del instrumento del líquido. Este tiempo suele oscilar entre 1 segundo y 3 segundos, y está ligado al volumen a dispensar, siendo 1 segundo recomendado para volúmenes hasta de 1 000 microlitros y 3 segundos para volúmenes mayores a 1 000 microlitros.

·      La inmersión de la punta, se recomienda que no sea superior a 6 milímetros, posiblemente siendo menor para volúmenes menores a 1 000 microlitros.

·      Para minimizar variaciones debido a posibles incrementos en la temperatura de los instrumentos, se recomienda el uso de guantes y la reducción del tiempo de contacto con la mano del operador.

·      Recordar que, la trazabilidad metrológica debe ser hacia las definiciones del Sistema Internacional de Unidades (SI), por lo que es una buena práctica, buscar laboratorios que puedan realizar la calibración demostrando su competencia técnica para estos procesos mediante acreditación o declaración de sus capacidades de medición y calibración.

Referencias

-       Directriz DKD-R 8-1 Calibración de pipetas de pistón con cámara de aire.

 

-       Norma ISO 8655-6, Piston-operated volumetric apparatus – Part 6: Gravimetric methods for the determination of measurement error.

 

-       https://www.youtube.com/watch?v=7gcyHrDAnfk